在追求高效、精確的分子生物學(xué)研究中，一臺性能穩(wěn)定的PCR儀是實驗室的核心設(shè)備。賽默飛世爾科技（Thermo Fisher Scientific）推出的ProFlex3 x 32 PCR熱循環(huán)儀 ，以其三區(qū)獨立溫控與32孔高通量設(shè)計，成為眾多科研與檢測實驗室提升效率的選擇。以下為您詳細(xì)介紹其安全、規(guī)范的操作流程，助您輕松駕馭這臺高性能儀器。

核心優(yōu)勢：

三區(qū)獨立溫控： 三個獨立溫控模塊，支持運行不同程序或優(yōu)化梯度實驗。

超大32孔容量： 單次運行可處理32個樣本，顯著提升實驗通量。

溫度均一性： 優(yōu)化的熱蓋與模塊設(shè)計，確?？组g溫差≤±0.25°C。

靈活梯度功能： 單模塊內(nèi)實現(xiàn)12列不同退火溫度優(yōu)化。

智能熱蓋壓力調(diào)節(jié)： 自動適應(yīng)不同耗材，密封更可靠。

ProFlex3 x 32 PCR熱循環(huán)儀標(biāo)準(zhǔn)操作流程：

一、 開機(jī)與準(zhǔn)備

儀器安置： 確保儀器放置于平穩(wěn)、干燥、通風(fēng)良好的實驗臺面，遠(yuǎn)離熱源、震動源及腐蝕性物質(zhì)。連接電源線。

開機(jī)自檢： 打開儀器主電源開關(guān)（通常位于背面或側(cè)面）。儀器啟動，屏幕亮起，自動進(jìn)行初始化及自檢（約需1-2分鐘）。

模塊安裝/確認(rèn)： 如需更換模塊（如由0.2ml模塊更換為0.5ml模塊），請遵循用戶手冊安全操作，確保模塊正確卡入并鎖定到位。日常使用確認(rèn)當(dāng)前模塊符合實驗需求。

預(yù)熱/預(yù)冷（可選）： 如需快速達(dá)到設(shè)定起始溫度（如4°C預(yù)冷或高溫啟動），可在主界面選擇“Preheat"或“Precool"功能設(shè)定目標(biāo)溫度啟動。

二、 樣品準(zhǔn)備與反應(yīng)體系構(gòu)建

耗材選擇： 根據(jù)實驗需求選擇經(jīng)認(rèn)證兼容 的0.2ml或0.5ml PCR管/板。

反應(yīng)體系配制： 在潔凈的實驗區(qū)域（推薦超凈臺或冰盒上），嚴(yán)格按照實驗方案配制PCR反應(yīng)混合液。確保各組分混合均勻（可用移液器輕輕吹打或短暫離心）。

分裝樣品： 將配制好的反應(yīng)液分裝至選定的PCR管或PCR板孔中。推薦使用光學(xué)透明蓋或?qū)Ｓ梅獍迥っ芊?，確保密封良好防止蒸發(fā)。

樣品裝載：

將裝有樣品的PCR管或板輕穩(wěn) 地放入模塊對應(yīng)的孔位中。

注意：若使用0.2ml管，確保管蓋整體閉合，且未突出模塊邊緣 ，否則可能影響熱蓋壓緊和溫度傳導(dǎo)。

確保樣品放置平整。

三、 程序編輯/調(diào)用與運行設(shè)置

新建/編輯程序：

在主界面選擇“Protocol Editor"。

輸入程序名稱。

按步驟添加所需溫控階段：變性 (Denaturation) 、 退火 (Annealing) 、 延伸 (Extension) 、 循環(huán)次數(shù) (Number of Cycles) 、 終延伸 (Final Extension) 、 保溫 (Hold) 。

為每個階段精確設(shè)置溫度 (°C) 、持續(xù)時間 (Time: 小時:分:秒) 。

善用梯度 (Gradient) 功能：在特定階段（通常是退火階段），可設(shè)置跨越一定溫度范圍（如50°C - 65°C），儀器將在單行（X軸）上自動實現(xiàn)12種不同溫度的梯度優(yōu)化。

設(shè)置熱蓋溫度 (Heated Lid) ：通常設(shè)置為105°C（推薦用于0.2ml管）或115°C（推薦用于0.5ml管及板）。此功能至關(guān)重要，可防止管蓋冷凝。

設(shè)置反應(yīng)體系體積 (Reaction Volume) ：告知儀器體積信息，有助于優(yōu)化溫度控制算法。

調(diào)用已有程序： 若使用標(biāo)準(zhǔn)程序，可在“Saved Protocols"列表中選擇所需程序。

運行設(shè)置： 在準(zhǔn)備好程序后，返回主界面。確認(rèn)樣品已裝載無誤。選擇目標(biāo)程序，按“Start"或“Run"鍵啟動運行。屏幕顯示運行狀態(tài)（當(dāng)前階段、溫度、剩余時間等）。

四、 運行監(jiān)控與應(yīng)急處理

實時監(jiān)控： 運行過程中，可通過儀器屏幕實時查看各模塊的溫度曲線、當(dāng)前階段及剩余時間等信息。

暫停/停止： 如遇特殊情況需暫停，可按“Pause"鍵（再次按“Start"繼續(xù)）。緊急情況下可直接按“Stop"鍵終止運行（謹(jǐn)慎使用）。

異常處理： 若儀器報警（如溫度錯誤、熱蓋錯誤等），請立即查看屏幕提示信息，并參照用戶手冊進(jìn)行故障排查。

五、 運行結(jié)束與樣品取出

運行完成： 當(dāng)程序執(zhí)行完畢，儀器發(fā)出提示音，屏幕顯示“Run Complete"或類似信息。

降溫等待： 程序結(jié)束后，熱蓋溫度會維持設(shè)定值一段時間后開始降溫，模塊則開始降溫至設(shè)定的保溫溫度或室溫。請勿立即打開熱蓋！ 內(nèi)部高溫蒸汽可能造成燙傷。

安全開蓋：

確認(rèn)模塊溫度已降至安全范圍（如< 60°C，具體參考手冊），且熱蓋溫度已明顯降低（可通過屏幕查看）。

戴好防燙手套（推薦）。

按下熱蓋打開按鈕或手柄，緩慢抬起熱蓋 ，讓內(nèi)部熱蒸汽散開。

取出樣品： 使用移液器或鑷子小心取出PCR管或板。注意樣品仍可能很熱 。立即將樣品置于冰上冷卻或進(jìn)行后續(xù)實驗步驟。

六、 關(guān)機(jī)與日常維護(hù)

關(guān)機(jī)： 日常使用后，若短時間內(nèi)不再使用，可在主界面選擇關(guān)機(jī)選項（如“Shut Down"），按提示操作。或直接關(guān)閉儀器背部電源開關(guān)。

清潔：

熱蓋清潔： 待儀器整體冷卻后 ，使用無塵棉簽 沾取少量蒸餾水或70%乙醇 ，輕柔擦拭 熱蓋底面（Thermal Pad）。切勿使用有機(jī)溶劑或硬物刮擦。

模塊清潔： 使用無塵棉簽 或壓縮空氣 清除模塊孔位內(nèi)灰塵或微小殘留物。嚴(yán)禁將液體直接倒入模塊孔內(nèi)。

外殼清潔： 用柔軟微濕 的布（可蘸少量溫和清潔劑）擦拭儀器外殼和屏幕，然后用干布擦干。禁止水流進(jìn)入儀器內(nèi)部 。

定期維護(hù)： 建議按照維護(hù)計劃或定期（如每6-12個月）由專業(yè)工程師進(jìn)行校準(zhǔn)和深度維護(hù)，確保儀器性能最佳。

操作安全關(guān)鍵點：

溫度警示： 運行中及運行后短時間內(nèi)，儀器模塊、熱蓋及樣品溫度高 ，操作時務(wù)必佩戴防熱手套，嚴(yán)格按規(guī)程等待降溫后才可開蓋取樣。

生物安全： 處理潛在生物危害性樣品時，務(wù)必在符合安全等級的實驗室進(jìn)行，使用帶濾芯的吸頭，并在實驗后對儀器接觸表面進(jìn)行整體消毒（按實驗室安全規(guī)程）。

電源安全： 確保電源接地良好，避免液體濺灑到儀器及電源線上。清潔時務(wù)必斷電。

耗材兼容： 僅使用 賽默飛認(rèn)證或明確兼容的PCR耗材。使用不當(dāng)耗材可能導(dǎo)致密封不良、溫度傳導(dǎo)不佳甚至破裂污染模塊。

選擇ProFlex3 x 32，選擇高效與可靠

賽默飛ProFlex3 x 32 PCR熱循環(huán)儀憑借其三區(qū)獨立運行能力、32樣本高通量和精確穩(wěn)定的溫度控制，為基因擴(kuò)增、基因分型、克隆測序等關(guān)鍵實驗提供強(qiáng)大支持。其直觀的操作界面和靈活的程序設(shè)置，讓復(fù)雜的實驗流程變得簡單高效。